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組織無機(jī)磷含量測定試劑盒(微量法 100T/96S)

貨號 SH0578 售價(元) 288
規(guī)格 100T/96S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0578

組織無機(jī)磷含量測定試劑盒(微量法 100T/96S)

100T/96S

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

無機(jī)磷主要指磷酸根,參與生物體內(nèi)多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等,此外促進(jìn)碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運。

測定原理:

鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì),通過測定660nm光吸收,即可計算無機(jī)磷含量。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0578-100T/96S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

5ml

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃

標(biāo)準(zhǔn)品:液體

1

4℃

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入10 ml蒸餾水,充分溶解后加入試劑二(全部),混勻。

自備儀器和用品:

離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

無機(jī)磷提?。?/span>

按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。10000rpm4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定:

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調(diào)零。

2.打開水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到40℃

3. 空白管:0.5ml EP管,依次加入100μl蒸餾水,100μl試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:0.5ml EP管,依次加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液,90μl蒸餾水,100μl試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測定管:0.5ml EP管,依次加入10μl上清液,90μl蒸餾水,100μl試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

組織無機(jī)磷含量計算:

(1) 按照蛋白含量計算

無機(jī)磷含量(μmol/mg prot)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V÷Cpr

=1×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

(2) 按照樣本質(zhì)量計算

無機(jī)磷含量(μmol/g 鮮重 )= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V÷W

=1×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:1mmol/L;V總:上清液總體積,1ml=0.001 L;W:樣品質(zhì)量,g

注意事項:

1. 試劑三需臨用前配制,并且當(dāng)天使用完畢。

2. 40min內(nèi)完成比色。

3. 最低檢出限為10μmol/L。

 

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