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產(chǎn)品簡介

RNA pull-down?是檢測目標RNA與其結(jié)合蛋白或結(jié)合RNA之間相互作用的主要方法之一。生物素RNA Pull-Down?試劑盒利用鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強親和力，高效調(diào)取目標RNA及其結(jié)合蛋白或結(jié)合RNA。

首先制備生物素標記的RNA探針，與樣本裂解液孵育，RNA探針與樣本中的某些蛋白質(zhì)或RNA結(jié)合形成復(fù)合體；鏈霉親和素磁珠特異性捕獲生物素標記的RNA探針，同時捕獲其結(jié)合蛋白或結(jié)合RNA；之后可以采用Western Blot、質(zhì)譜（LC-MS/MS）方法檢測結(jié)合蛋白，或者采用qPCR、測序（seq）方法檢測結(jié)合RNA。

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試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個反應(yīng)的試劑，每個反應(yīng)使用40μL磁珠。由于每次pull-down實驗至少需要設(shè)置一個實驗組和一個陰性對照組，因此一次實驗至少需要使用2個反應(yīng)的試劑量。

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額外所需材料

1. 自備材料：PBS、RNase-free 水、生物素標記的RNA探針或制備探針所需的材料【T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒、DNA凝膠回收試劑盒、生物素RNA標記混合物（Biotin RNA labeling Mix）、RNA純化試劑盒（RNeasy ?Mini Kit）】、微量RNA提取試劑盒或提取RNA所需的材料【Trizol、氯仿、異丙醇、75%乙醇】。

2.?所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機、超聲波破碎儀。

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使用說明

I 注意事項

1. 請勿干燥或劇烈渦旋磁珠，禁止長時間置于磁場，這些操作可能會引起磁珠聚團，降低結(jié)合活性。

2. 為保證磁珠均勻分布，請在使用前通過反復(fù)顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。

3. 請務(wù)必使用無 RNase 的離心管、槍頭等實驗材料。

4. 具體樣品量和孵育時間依賴于每個特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。?

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說明書：F1502 生物素RNA Pull-Down試劑盒（動物）.pdf (238.36 K)