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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

免疫共沉淀（Co-IP）是研究體內(nèi)條件下蛋白與蛋白相互作用的技術(shù)。樣本裂解后，加入誘餌蛋白的IP級(jí)別抗體；抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成免疫復(fù)合物，再加入 protein G 樹(shù)脂捕獲“抗體-誘餌蛋白-結(jié)合蛋白”復(fù)合體。去除未結(jié)合的物質(zhì)后，洗脫誘餌蛋白及其結(jié)合蛋白，蛋白產(chǎn)物可以用于western-blot檢測(cè)或質(zhì)譜分析。本試劑盒采用Protein G來(lái)結(jié)合抗體，因此最終洗脫液中也會(huì)含有抗體的重鏈（50 kDa）和輕鏈（25 kDa）。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應(yīng)的試劑，每個(gè)反應(yīng)使用20μL 樹(shù)脂。由于每次 IP 實(shí)驗(yàn)至少需要設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)陰性對(duì)照組，因此一次實(shí)驗(yàn)至少需要使用2個(gè)反應(yīng)的試劑量。

額外所需材料

自備試劑：誘餌蛋白的 IP 級(jí)別抗體、Normal IgG、PBS。

所需儀器：混勻儀、低溫離心機(jī)、超聲波破碎儀。

使用說(shuō)明

I 注意事項(xiàng)

1. 請(qǐng)勿干燥、冷凍或劇烈渦旋樹(shù)脂，這些操作會(huì)導(dǎo)致樹(shù)脂聚集而降低結(jié)合能力。

2. 為保證樹(shù)脂均勻分布，請(qǐng)?jiān)谑褂们巴ㄟ^(guò)反復(fù)顛倒、輕微渦旋徹底混勻樹(shù)脂。

3. 在吸取樹(shù)脂前，請(qǐng)將移液槍槍頭尖部剪掉 1～2mm。

4. 吸取樹(shù)脂后，剩余樹(shù)脂請(qǐng)用封口膜封好再存放，防止保存液蒸發(fā)。

5. 樹(shù)脂的離心步驟需在低速條件下操作，離心速度大于 5000×g可能會(huì)導(dǎo)致樹(shù)脂聚集和再懸浮困難。

6. 實(shí)驗(yàn)的具體樣品量和孵育時(shí)間依賴(lài)于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

7. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

說(shuō)明書(shū)：F1613 Protein G 免疫共沉淀試劑盒（植物）.pdf (185.23 K)